在生物實(shí)驗(yàn)室里，給細(xì)胞“數(shù)數(shù)"和“判斷死活"是再日常不過(guò)的操作。傳統(tǒng)上，我們依賴臺(tái)盼藍(lán)染色或AO/PI熒光染色——染了色的死細(xì)胞變藍(lán)或發(fā)熒光，沒染色的活細(xì)胞保持透明。

這個(gè)方法用了快一百年，但問(wèn)題也不少：

染料可能對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生輕微毒性；

染料沉淀會(huì)干擾識(shí)別，導(dǎo)致計(jì)數(shù)不準(zhǔn)；

最關(guān)鍵的是，臺(tái)盼藍(lán)只能區(qū)分“活"與“死"，對(duì)處于“凋亡"過(guò)程中的細(xì)胞毫無(wú)辦法。

那么，有沒有一種方法，不染色、不傷細(xì)胞、還能看清細(xì)胞從健康到死亡的全過(guò)程？

梅特勒托利多最近推出的 CytoDirect 數(shù)字全息無(wú)染色細(xì)胞計(jì)數(shù)儀，給出了答案。

?? 核心技術(shù)：數(shù)字全息 + 機(jī)器學(xué)習(xí)

CytoDirect 內(nèi)部沒有傳統(tǒng)顯微鏡的目鏡和物鏡，而是采用數(shù)字全息顯微鏡技術(shù)（DHM）。它通過(guò)激光干涉生成細(xì)胞的全息圖，再通過(guò)算法重建出細(xì)胞的相位圖像。因?yàn)榛罴?xì)胞、死細(xì)胞、細(xì)胞碎片對(duì)光的折射率不同，軟件能自動(dòng)將它們區(qū)分開來(lái)。

在此基礎(chǔ)上，儀器搭載了基于CNN卷積神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)的機(jī)器學(xué)習(xí)算法，可以精準(zhǔn)分類：

活細(xì)胞

凋亡中細(xì)胞

死細(xì)胞

細(xì)胞碎片

這意味著，你不僅能知道細(xì)胞活率，還能看到凋亡的比例——這對(duì)于藥物毒性評(píng)估、培養(yǎng)條件優(yōu)化非常有用。

? 極簡(jiǎn)操作：15秒出結(jié)果

CytoDirect 的操作簡(jiǎn)單到幾乎不需要培訓(xùn)：

制備細(xì)胞懸液（無(wú)需任何染色）

吸取20μL樣品加到專用計(jì)數(shù)板上

將計(jì)數(shù)板插入儀器，自動(dòng)開始檢測(cè)

15秒后，屏幕上顯示濃度、活率、凋亡比例等數(shù)據(jù)

一鍵導(dǎo)出PDF或CSV報(bào)告

而且它不需要手動(dòng)找焦平面，避免了不同操作者之間的對(duì)焦誤差，重復(fù)性佳。

?? 參數(shù)與性能

檢測(cè)范圍：3μm – 78μm，覆蓋絕大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞（CHO、HEK293、MSC等）

檢測(cè)速度：?jiǎn)未?5秒

活率閾值：可自定義，適應(yīng)不同細(xì)胞系的判斷標(biāo)準(zhǔn)

數(shù)據(jù)一致性：與流式細(xì)胞術(shù)高度相關(guān)

?? 與傳統(tǒng)方法的對(duì)比