技術(shù)文章
更新時間:2023-04-07
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體外細胞的有效培養(yǎng)新概念——“細胞質(zhì)控"。通過細胞活力、細胞凋亡、細胞周期、細胞增殖及DNA損傷五方面對細胞生長生存狀態(tài)進行監(jiān)控。
滿足以下兩個條件就可以進行細胞活力檢測
1. 正常細胞的細胞膜是完整的。
Propidium iodide(PI碘化丙啶)是一種核酸染料,常用于細胞凋亡(apoptosis)或細胞壞死(necrosis)的檢測和流式細胞儀分析。PI不能通過正常完整的細胞膜,故細胞在處于壞死或晚期凋亡時細胞膜被破壞,這時可為PI著紅色,可以用來分辨壞死細胞/正常細胞。




細胞活力的技術(shù)標準界定
納米藥物的研究是近年來新藥研發(fā)的熱點。納米藥物載體篩選的首要標準是檢測其對細胞的毒性。而在細胞毒性測試中,首先要排除的是基底培養(yǎng)過程中產(chǎn)生的死細胞,即“噪音信號"。在對新型納米藥物載體SEONLA的研究中,Zaloga等人認為只有活細胞比例超過90%方可進行細胞毒性研究,細胞質(zhì)控的重要性由此可見一斑。


細胞質(zhì)控儀測得數(shù)據(jù)
除了細胞毒性研究,細胞質(zhì)控在病毒感染或者RNA轉(zhuǎn)染的研究中也是非常重要的。在這一類研究中,轉(zhuǎn)染/感染試劑或多或少都會對細胞有一定殺傷作用。因此,在轉(zhuǎn)染之前,活細胞需要達到一定的比例才可以保證在轉(zhuǎn)染之后有足夠數(shù)量的細胞進行后續(xù)的研究。而這一比例需要實驗條件摸索才能確定。

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